兔病毒性出血症及大肠杆菌混合感染

养兔

1 发病情况

广州地区某兔场有种兔和断奶仔兔800多只，发病1～2天后出现大量死亡，最多1天死亡70多只。发病后兔场兽医用抗生素及磺胺类药物治疗，效果不理想，始终未能有效控制疫情。发病率和病死率分别为60%和80%左右。60日龄以下的仔兔病死数占总死亡数的32%(130/402)。?

2 临床症状

病兔精神沉郁，食欲减退，呼吸急促，死前鸣叫，划动四肢。病兔腹部臌胀，病初粪便细小，外包有透明、冻胶状黏液，随后排稀薄黄色粪便，以至棕色水样腹泻。并有特殊的臭味。肛门周围及后肢等处和被毛粘有多量的粪便。?

3 病理变化

共剖检病死兔12只，其中3只为60日龄以下的仔兔，9只为成年兔和种兔；剖检病变基本一致，均见肺严重瘀血，脾肿大呈蓝紫色，肝肿大呈淡黄色，肾出血呈暗红色，气管有血液泡沫，气管环充血出血，膀胱充满尿液。其中11只病死兔的胃内充满液体和气体，胃黏膜出血，十二指肠充满气体，空肠、回肠和盲肠充满胶冻样液体，肠黏膜充血、水肿。?

4 实验室诊断

(1)分别取12只病死兔的肝、脾和心血涂片，革兰氏染色，镜检，结果11/12见有两端钝圆中等大小的革兰氏阴性杆菌。

(2)接种培养 取12只病死兔的肝、脾分别接种于鲜血琼脂平板和麦康凯平板，37℃培养24h，鲜血琼脂平板上形成中等大小、圆形、乳白色、隆起、表面光滑的菌落，直径约2 mm。麦康凯平板则形成中间凹陷的粉红色菌落，直径约1～2 mm。分别挑取这两种培养基上的菌落涂片、革兰氏染色，镜检，均为中等大小，革兰氏阴性杆菌。从12只病死兔中共分离出11株细菌；11株细菌的菌落形态、培养特性一致。

(3)取这11株细菌的纯培养物分别进行生化试验，结果这11株细菌均能产生吲哚；M.R.试验阳性；V?P试验阴性；不利用枸橼酸盐；不产生硫化氢；能发酵乳糖、麦芽糖、葡萄糖、产酸产气；能发酵甘露醇，产酸不产气；不发酵蔗糖；不液化明胶；不水解尿素酶；能还原硝酸盐。初步鉴定为大肠埃希氏杆菌。

(4)取经生化鉴定的纯培养物，接种于肉汤培养基中，37℃培养18～20h，用此菌液皮下注射18～22 g小鼠5只，0.1 ml/只，24～36 h内4只小鼠先后死亡，并从死亡的5只小鼠中回收到致病性大肠杆菌，培养特性和镜检形态与从病死兔中分离的菌株一致。而对照组2只小鼠7天后仍健活。分别取12只病死兔的肝、脾、肺和肾各小许，混合称重，用组织捣碎机捣碎，按1∶10加入灭菌生理盐水制成悬液，经3 000 r/min离心20 min，取上清液加入青霉素、链霉素各?1 000 IU(μg)/ml?，置4℃冰箱内作用4 h，然后用细菌滤器过滤，取滤液皮下注射2只体重2 kg左右的健康兔，?1 ml/?只。同时吸取滤液0.5 ml接种于肉汤培养基中，37℃培养48 h，结果为阴性。注射病料滤液后的兔只，在40～72 h内先后死亡，并现兔瘟典型的临床症状及病理变化。取肝、脾接种于鲜血琼脂平板及麦康凯平板，37℃温箱培养48 h，结果均无任何细菌生长。

(5)以剖检的12只病死兔的肝、脾、肺和肾等病料以及2只由上述实验中发病死亡兔的肝、脾、肺和肾制备14份1∶10悬液，分别以1%人的“O”型红细胞作血凝试验，结果14份被检样本均呈明显凝集，为阳性反应。试验中同时设立正常兔的肝、脾提取物作阴性对照。


(6)取经生化试验鉴定的大肠杆菌纯培养物，用扩散法，使用杭州天和微生物试剂有限公司生产的药敏纸片，在普通琼脂平板上进行药敏感试验，结果筛选出高敏药物为头孢唑啉和恩诺沙星；中度敏感药物为氟哌酸和丁胺卡那霉素。?

5 防治措施

(1)隔离发病兔只，在远离兔场的地方加强力消毒灵、深埋病死兔只，用1∶500的强力消毒灵对兔舍环境、地面、笼具、用具、饲槽等进行全面彻底消毒。

(2)用该场病死兔的肝、脾、肺等组织制成的兔瘟组织灭活苗和以该场分离的菌株制备的大肠杆菌灭活苗，对该场的兔群进行紧急免疫接种，20～30日龄的仔兔，每只皮下注射大肠杆菌灭活苗1ml；30日龄以上的大、小兔每只皮下注射兔瘟组织灭活苗和大肠杆菌灭活苗各2 ml。

(3)对全场兔只注射恩诺沙星，连续3天；在全场兔群饲料中添加恩诺沙星，并在饮水中添加维生素C、葡萄糖和氟哌酸，连续饲喂10天。经采取紧急免疫接种和药物治疗，7天后兔只死亡减少，10天后基本控制疫情，没出现新的病例。