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金乡县国庆兔业

我想请教的问题是；人工授精都需要那些步骤，以及所注意的问题。请各位同仁赐教，在此谢谢了。

lei30091

兔子人工授精技术

兔子人工授精技术是家兔繁殖、品种改良工作中最经济最科学的方法。它是采用人工采精，对精液品质进行鉴定后，用稀释液稀释后，通过人工输入到发情母兔生殖道内，代替自然交配。其最大的优点：节约人工，集中管理。 开展人工授精的的兔场做到四同：同期发情，同期配种，同期产仔，同期出栏。从而达到四省：省料，省人，省时，省钱。 开展人工授精能降低公兔饲养数量，将原本的公母比例从1：4－8降到1：80－120.大量节省公兔所使用的笼位、饲料、饲养人工，同期催情大量节省检查时间，省事省工。最终的结果就是节省成本， 800只母兔以上的兔场，效果更加明显。
肉兔人工授精流程
人工授精流程
一、准备工具：
采精器：塑料管、避孕套
输精器：注射器、输精管
保温设备：保温集精瓶（35℃-38℃）（保证取出精液的温度），
保温盆（45℃-50℃）（用于保证采精器内的温度）
稀释液：建议使用进口稀释液
储精杯，酒精棉，温度计，润滑剂或凡士林
显微镜：载玻片，盖玻片
二、人工授精的优势
1.充分利用优良种公兔：一次人工授精可配8-15只母兔，提高公兔利用率8倍以上；
2.少养公兔，降低养兔的成本；
3.有利于防止疾病传染；
4.预先检查精液的品质，保证了精子密度和活力，授精时又把精子输送到深部，授精准胎率可达90％以上；
5.人工授精设备可以自制，方法简单，有利于推广。
三、采精器的制作
    一般没有市售的采精器，都是自己做的。它包括一个外壳、内胎和集精器三部分。外壳可以用竹筒或硬橡胶管代替，长15cm，直径5cm；内胎可以用硬质海绵制作，长20cm，直径6cm，孔径0.5cm的圆筒，在一段孔口处剪成三角形；集精器可用避孕套。将集精器放入内胎的孔中，再将内胎塞入外壳中，避孕套比采精器外壳长，露出外壳另一端的避孕套的开口处向外翻转套在外壳上、扎紧，使其不漏水、不透气。注水时从外壳后部注入50度温度，采精时保证采精器内的温度在40～42度。
四、采精流程
1. 准备工作
采精前将采精器各个部位详细检查，防止有破损处，并对避孕套进行洗涤、消毒。从外壳后部小孔中注入50～55度温水，使内胎温度达到40～42度，如何在避孕套口部涂上凡士林或专用润滑剂起到润滑作用。最后调试温度，调整内胎口呈三角型。将公兔放入采精台上，一人照管让它熟悉环境，再捉一只正在发情的母兔与公兔放在一起，诱导公兔起性反射。
2.采精操作
采精者左手抓住母兔耳朵和颈背部领皮，右手握采精器伸向母兔的后腹部两后肢间，准备好后将公兔放入使其爬跨母兔，把母兔臀部托起，模仿交配母兔姿势。当公兔臀部频频抽动时，采精者将采精器从母兔后肢间伸出，接触公兔阴茎，当公兔的性反射中枢受到刺激立即引起性反应而射出精液。当公兔射精后尖叫一声倒在笼帝时，采精者将采精器立即竖起，防止精液倒流。每次采精1毫升左右。然后将避孕套取出，将精液倒入集精瓶，准备检查精液品质。
3.精液稀释
经过检查可以使用的精液要进行稀释，精液稀释的目的是扩大精液的量和延长精子的寿命，便于保存和运输。稀释液种类比较多，常用的生理盐水或5％葡萄糖溶液；这些稀释液经过消毒降温后也可加入少量抗生素便可使用。使用稀释液温度应在35度左右，稀释倍数为1：5～1：8，保持每毫升稀释精液中有1000万活力旺盛的精子即可。
五、检测精子品质
如果没有检查过精液品质的公兔，需要进行精液的 品质的检查，以便掌握公兔的精液品质。一般来说，优良的精液才能用来做人工授精用。
精液品质包括以下几个方面：精液量、颜色、气味、混浊度、密度÷活力、畸形率、精子生存能力等，常规检查精液量、颜色、气味、混浊度、活力、畸形率。
精液量：一般约为1-2ml
颜色和气味：正常的精液颜色为灰白色或乳白色。若混有尿液时带琥珀色，混有新鲜血液时带红色，混有陈血或组织细胞带褐色，混有化脓性东西时带绿色。新鲜精液一般无臭味。
混浊度：用肉眼观察可推知精子活力和密度。如何精液似云雾滚动，且混浊则表示活力大、密度大。
密度：取精液一滴滴在精子密度检测玻片上用显微镜检查精子活动力和密度。精子密度分为3级。
1.稠密：在显微镜视野内精子与精子之间所留的空隙不足容纳一个精子的长度，因为精子彼此相靠很近，所以很难看出单个精子的活动情况，
2.中等：精子稍稀，彼此间距离大约可容1～2个精子，且单个精子的活动可以看得清
楚。
3.稀薄：精子很少，彼此间距离很大。
活力：也是鉴定精液品质的最主要指标之一。由于精子活动力受温度影响很大，检查时最好在35-38度时进行。如果温度过高，则活动异常激烈，精子存活时间短；温度过低，则精子活动缓慢，特别是10度以下时精子活动更加迟钝，在5～6度精子活动几乎停止。
精子活动力检查时，精液不能太少，精液过少容易风干，可加1～2滴精液于载玻片上，再加数滴稀释液，再观察精子运动。精子运动方式分3种 。
1.前进式，即精子呈直线前进运动。
2.旋转式，精子呈旋转式运动。
3.摆动式，精子原位置摆动，不前进。
为了保证兔人工授精有较高的准确率，规定精液密度中等以上，精子活力为三级以上，即精子中有3/5的精子呈前进式运动。
畸形率：精子畸形率达到14-18%的公兔都不能继续留用。
六、输精
输精可用兔用输精器也可自制。自制方法可以用注射器插一根8-10cm的细胶管；也可用吸滴管尖部套一段8-10cm的细胶管。
输精时将注射器式吸滴管吸取稀释后的精液，将胶皮管插入母兔阴道6-7cm，然后慢慢输入精液0.5-0.8毫升左右。而后用手轻捏外阴部，加速阴道的收缩，避免精液倒流，将母兔放置地上，轻拍两下母兔臀部也可加速阴道的收缩。
五、促排方法
因为兔为刺激排卵的动物，输精以前要对母兔进行促进排卵的处理：
1．可用结扎输精管的公兔爬跨刺激。
2．可用激素刺激，给母肌注促排卵3号0.5毫克，在注射后5～6小时输精可以收到满意的效果。
3．对发情的母兔静脉注射1％硫酸铜溶液10-15毫升，也有明显的促排效果。

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六、注意事项
1．做好保温工作。
2．因为家兔生殖道很脆弱，输精部位要准确，输精操作动作要缓慢要轻柔，以防造成损伤。另外不能插入尿道，也不能插的过深。
3．输精后的工作：输精后要将用过的器械立即洗净，烘干备用，并立即做好输精记录，以便做妊记录。
核心理念：人工授精技术其实是最容易掌握的一项熟练技术。只要你下决心迷上这项技术，就可以让它每年至少给你创造几万甚至几十万的收益。
肉兔实行人工授精是一项先进科学的配种方法以，它与传统的自然效配方式比较有以下特点：（1）可以节省种公兔的饲养成本；（2）可以防止品种退化，保持和不断提高兔群的品质和质量；（3）可以充分利用优良种公兔的精液资源，而且繁殖的仔兔个体大，生长快，成活率高，出栏早，收入多；（4）避免了种兔间的直接接触机会，可预防兔病的传播。
1、采精中的技术要领
（1）种公兔的准备。种公兔在采精前1个星期和整个采精期间必须加强营养、增强光照和运动，并每天放到外边活动2个小时。经过1个星期的营养补充和诱导发情后，其性活动已明显增强，此时也是精液生成最旺盛的时机。有采精的前2天，让公兔与母兔自钛交配2次，这时，再采精便会获得最佳品质的精液。采精的时间最好选择家兔性欲最活跃的清晨或晚上凉爽时进行。
第一次采精后，可每隔1天采2次（清晨、晚上各1次）连续2个星期、休息1个星期，然后重复上述过程。如果公兔已停止使用15天以上，在使用前都要有一个上述的调理过程。
（2）采精器的准备
第一、假阴道，外壳为直径30毫米、长80-85毫米的硬塑料管，内胎为人用避孕套。
第二，采精杯，为双层玻璃瓶。外层为棕色保护瓶，内层为贮精瓶，两层中间是45℃保温水。
第三，采精器的清洗与消毒。上述物品在使用前先用洗衣粉和1%高猛酸钾刷洗干净，再用自来水、蒸馏水（或注射用水）依次冲洗，然后将塑料管和集精杯在干燥箱内160℃或在沸水内消毒20-30分钟。避孕套有蒸气消毒15分钟。消毒是关系精液品质保存的关健环节，一定要一丝不茍地进行。
第四，假阴道的安装。首先将消毒好的避孕套从管内穿过，从管的另一端穿出，这时将40毫升45℃热水倒到避孕套和塑料管中间。然后，把避孕套穿出来的这一端翻过来，同样套在塑料管上，并用皮筋或胶圈固定，防止漏水或滑脱。集精杯两层中间加37℃灭菌温水，然后安装在假阴道的一端，固定。使用前采精器整个内腔用配制的等渗精液稀释液冲洗1-2次。
第五、采精的方法。将大小适宜、体质健壮、发情良好的母兔作台兔，将其阴部清洗消毒后，抓到公兔笼内，先让先让公兔与母兔调情片刻，以引起公兔的性欲。当公兔出现性冲动开始爬跨时，立即将它拉开，再爬跨再拉开，如此反复3-4次，当公兔性欲达到最强烈时，采精者左手抓信台兔的双耳及领皮，头向采精者方向固定，右手握信安装好的假阴道，以中指和无名指护住集精杯，从台兔腹部一侧伸向台兔两后腿之间，使假阴道口紧贴在阴门下部，并稍微用力托起台兔臂部，当公兔爬跨阴茎挺出时，立即调整方向的位置，用假阴道迎接交合，只要方向和位置适宜。公兔一般都能把阴茎插入假阴道内。此时，公兔臀部快速抽动，然后突然向前一挺，伴随一声尖叫，倒在台兔一侧，说明公兔已射精完毕。这时，及时把假阴道迅速抽出。竖直，取下集精杯，采精完。
2、精液品质检验要领
采集的精液一般都要进行品质检验。精液的品质检查主要包括以下内容。
（1）射精量一般公兔射精量为0.5-2毫升，根据其射精间隔时间的长短有一定的影响，精量越多，精子密度越高，活力越强，表示精液品质良好。
（2）颜色和气味。正常家兔的精液颜色为粘稠的淡乳白色，略带腥味或无味。
（3）精子的活力。根据呈直线前进运动的精子总量提百分比而判定。一般等级为十个等级。如果全部精子几乎都是呈直线前过运动的则评为1.0级，如果90%呈直线运动则评为0.9级，依此类推，直到0.1级。如果没有直线运动的精子，则为0级。
观察方法是： 将0.5毫升精子在35℃温水中预热和液化5分钟，然后，用吸管吸取少许精液，滴于载玻片上，轻轻盖好玻片，放在显微镜下观察，看精子的活力和密度大小。优质精液，呈直线运动的精子在70%以上。合格精液呈直线运动的精子在60%以上。
（4）精子密度测定。
计数法；取精液稀释液1毫升开试管内，用毛细吸管吸取0.01毫升精液于稀释液内混匀，然后用滴棒将稀释好的精液滴入血细胞计数板的计数池内，计数5个方格内的精子数，乘10万即可得每毫升精子总数。精子总数在2亿以上为优，1亿以上为合格。
在进行人工授精时，所采用的精液其射精量应2毫升左右，精子活力在0.7以上，精子密度为每毫升1.5亿以上的优良品质精液。
（5）精子的形态是关系到精子质量的另一项重要指标。正常的精子呈比例匀称的蝌蚪形。畸形精子有头部过大、头部过小、头部残缺、头部断折、双头双尾、尾部卷曲断折等多种，未成熟的精子也属畸形精子，正常情况下，精子畸形率一般不超过15%.
精子形态检查如下；用清洁吸管吸取原精液一小滴于干净玻片一端，另取一载玻片如制作血片一样制成均匀的精液抹片。待抹片自然干燥后，用龙胆紫染色3分钟，冲去染料后，用滤红吸干水分放在400或600位显微镜下观察，计数500个精子，数出畸形精子。计算公式为：
畸形率=畸形数/500×100%
3、精液的稀释
采出的精液在人工输清时都要先进行稀释。稀释的目的是为了扩大精液的容积，增强精子的活力，延长精子的寿命，便于精子的运输和保存。常用的精液稀释液有以下四种。
（1）5%的葡萄糖卵黄稀释液。用瓶装人用10%的葡萄糖溶液稀释成7.6%的浓度，用注射器抽取1-3毫升新鲜的卵黄加入到7.6%的葡萄糖溶液中，然后加入青、链霉素各10万单位摇匀即成。
（2）11%的蔗糖卵黄稀释液。取蔗糖11克加蒸馏水80毫升，待溶解后加水到100毫升，过滤，密封，高压灭菌20分钟，待温度降到25℃时，用注射器抽取1-3毫升新鲜卵黄加入11%的蔗糖溶液内，再加青、链霉素各10万单位摇匀即成。
（3）蔗糖、奶粉、磷酸盐稀释液。取磷酸二氢钠0.41克，磷酸氢二钠1.69克，溶于50毫升蒸馏水中，取蔗糖5.5克，牛奶2.5克放入磷酸盐溶液中，再加蒸馏水到100毫升。过滤后密封高压消毒20分钟，冷后加入青、链霉素各10万单位摇匀即成。
（4）进口的肉兔精液稀释液。质量稳定，价格略高。
自配的稀释液可在4℃时保存14天。最好现用现配，以免时间过久变质腐败。
精液稀释时，取品质优良的精液1毫升和精液稀释液3-5毫升混合即成。

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4、输精技术要点
家兔人工授精应着重掌握什么时候输和怎样输两个要点。
家兔属于交配刺激排孵的动物。也就是说母兔在发情期间，只有经过公兔爬跨交配刺激后，母兔卵巢中的卵才会在10-12小时排出来。若不进行交配刺激，卵巢中的卵便会在体内自行萎缩，退化吸收。因此在输精前，必须注射性激素促其卵巢排卵。肌肉注射促排3号5微克，6小时后输精。或静注人绒毛膜促性腺激素500IU立即输精。
（1）输精器的准备。备用5ml注射器和1根150毫米的女用导尿管经消毒处理后，放在无菌盒中待用。
输精前用注射器吸取2-3毫升精液稀释液套上输精管冲洗1-2次，然后将待输的精液吸入注射器中。这里有一个重要的操作环节请注意，为了防止精液在输精管中滞留，可在注射器抽取精液之前先吸入1毫升的空气。输精时连同空气一同推入阴道内，这样输精管内的精液可全部推入阴道。
（2）输精操作先将母兔保定好，外阴用生理盐水或5%的葡萄糖冲洗液擦洗干净。然后所母兔臀部抬高，输精者左手分开阴唇，右手持输精管缓缓插入阴道。当插入7-8厘米时（家兔阴道长度一般在8-12厘米）将胶管来回抽动数次，刺激母兔，然后将精液注入。输完后，将母兔臀部拍几下，让母兔阴道收缩，这样可防止精液倒流，输精后要让母兔安静休息。
（3）注意事项
第一、在整个输精过程中一定要严格消毒，无菌操作。防止出现感染。
第二、在整个输精过程，要保证输精器具内没有对精子有害的药物及液体，保证精液温度和输入过程尽量模仿生物自然交配过程，手法要轻，操作要干净利落。
第三、输精的部位一定要准确无误。母兔的膀胱在阴道内5-6厘米溶处的下方，插入输精管时，极易插入尿道中，因此在插管时要沿阴道壁的背侧面插入约6-7厘米深处。越过尿道口以后再往里插1-2厘米，如没有尿液流出证明已插入子宫，这时再输入精液。
第四、输精完毕后，器具要及时清洗，消毒，防止液体在里边粘结，影响下次使用。
第五、输精完后及时进行登记、备案。
5.精液的保存
精液经过稀释处理后，可以存放在一定的恒定温度中保存旭果现采现用。精液保存在30℃左右的环境中即可。若存放4-8小时，可保存在15-20℃的环境中。若需长时间保存则须先缓慢降温，再放入冰箱（或冷藏杯等其他代用物）保存在0-5℃的环境中，使用时再缓慢升温。据实验，只要保存得当，精子生存时间可达200小时以上。
人工授精是一项必须经过长时间实践摸索才能熟练掌握的一项实用技术。绝对不是告诉你怎样操作，你就能立刻掌握的。必须有一个反复熟练的过程

金乡县国庆兔业

谢谢你。